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技術(shù)文章

恒遠生物為大家分享胎牛血清正確的存放和解凍

點(diǎn)擊次數:11138   發(fā)布時(shí)間:2024/4/28 17:38:18

 胎牛血清在科研市場(chǎng)上應用廣泛,但對于胎牛血清的使用及保存,有一部分人可能不是很清楚,下面恒遠生物把胎牛血清的儲存、常見(jiàn)問(wèn)題以及處理方法分享給大家。

一、不使產(chǎn)品質(zhì)量受損的儲存和解凍血清


未拆封的血清,一般情況下應存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規定的效期內均可使用,若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至合適大小的無(wú)菌離心管內,再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過(guò)水浴鍋促使其溶解。


注:融解過(guò)程中必須規則地搖晃均勻。溶解后建議盡快使用,若長(cháng)時(shí)間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。


二、血清中的絮狀沉淀是什么應該如何處理


1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過(guò)夜。


2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續4℃2~3小時(shí)。


3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右。


4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。


三、如何處理解凍后出現的絮狀沉淀物


1.胎牛血清中沉淀物出現的原因有許多種,但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白)在胎牛血清解凍后,也會(huì )存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因。(這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。)


2.若想去除這些絮狀沉淀物,可將胎牛血清分裝至無(wú)菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。(不建議以過(guò)濾的方式去除絮狀沉淀物,會(huì )有阻塞過(guò)濾膜的可能)。


3.解凍胎牛血清時(shí),按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。(解凍時(shí)均勻搖晃胎牛血清,減少沉淀的發(fā)生)。


4.請勿將胎牛血清置于37℃太久,因為會(huì )導致胎牛血清變得混濁,同時(shí)胎牛血清中許多較不穩定的成分也會(huì )受到損害,影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,即無(wú)須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。


四、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀


1.解凍時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一。

2.分裝凍存時(shí),須規則搖晃均勻(勿造成氣泡)。

3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,較大的溫差,易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀。

4.切勿將血清置于37℃過(guò)長(cháng)時(shí)間,否則可能使之渾濁,其中一些不穩定的組分也會(huì )因此受到影響,終降低血清的品質(zhì)。


5.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,即無(wú)須做此步驟。

6.若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且保持搖晃均勻。溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì )造成沉淀物的增多。

原創(chuàng )作者:上海恒遠生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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